Thyroïdectomie et pesée des thyroïdes

Thyroïdectomie et pesée des thyroïdes

Administration de T3 et validation du modèle

Dès le lendemain de la thyroïdectomie (entre J28 et J32) et jusqu’à J86, la T3 a été administrée quotidiennement aux 15 brebis par voie sous cutanée à la dose de 3 μg/kg afin de maintenir un état euthyroïdien vis-à-vis de la T3.
Pour vérifier notre modèle euthyroïdien pour T3, les concentrations plasmatiques de T3 ont été dosées à J41, J43 et J46 après le début du traitement PBDE.

Pharmacocinétique de T4

A J47, après élimination de la T4 endogène, la thyroxine a été administrée aux brebis à la dose de 10 μg/kg par voie intraveineuse.Des prélèvements sanguins ont été effectués 30, 15 min et juste avant l’administration de T4, puis aux temps 1, 2, 4, 8, 15, 30, 45, 60, 90, 120 min post injection, toutes les heures jusqu’à 12h, aux temps 24, 36, 48h et tous les jours pendant 10 jours.

Evaluation de l’effet des PBDE sur la liaison aux protéines plasmatiques

Etudes in vitro
L’influence du traitement PBDE sur la liaison des hormones thyroïdiennes aux protéines plasmatiques a été évaluée in vitro en dosant par radioimmunologie la T3 libre et la T3 totale en présence de concentrations croissantes de déca-BDE et de penta-BDE (0, 0,1, 1, 10 et 100 μg/mL) sur un pool de plasmas provenant de 4 brebis thyroïdectomisées supplémentées en T3 à la dose de 3 μg/kg par voie SC.
Dans un second temps, la capacité des PBDE à déplacer la T3 de ses sites de liaison aux protéines plasmatiques a été évaluée via la détermination du pourcentage de T3 libre par la méthode de dialyse à l’équilibre en l’absence et en présence de 4 concentrations de déca-BDE et de penta- BDE. Le penta-BDE et le déca-BDE ont été ajoutés aux concentrations finales de 0, 10, 100, 500 et 1000 ng/mL dans le pool de plasma déthyroïdé de brebis surchargé en T3 à une concentration de 5 ng/mL.

Etudes in vivo

L’effet du traitement PBDE sur la liaison des hormones thyroïdiennes aux protéines plasmatiques a été évalué par une méthode de dialyse à l’équilibre dans trois expériences :
– Sur les 15 brebis entières, le pourcentage de T3 libre a été évalué par dialyse à l’équilibre avant et après les 28 jours de traitement aux PBDE. La dialyse a été réalisée sur les 5ème et 12ème prélèvements sanguins des profils pour lesquels, les dosages de la T3 totale et libre ont été réalisés par radioimmunologie.
– A titre d’essai, la dialyse à l’équilibre a été réalisée sur le plasma de deux brebis avant et après traitement au déca-BDE (B6 et B7) et de deux brebis avant et après traitement au penta-BDE (B11 et B12) pour évaluer l’effet du traitement sur les paramètres de liaison de T3 aux protéines plasmatiques. 40 mL de plasma collectés avant et après 28 jours de traitement aux PBDE ont été utilisés et déthyroïdés avec du charbon-dextran.
– La dialyse à l’équilibre a été réalisée sur les 14 brebis thyroïdectomisées et supplémentées en T3 pour évaluer l’effet des 39-46 jours de traitement PBDE sur les paramètres de liaison de T3 aux protéines plasmatiques. Un pool de plasma prélevé à J39, J41, J43 et J46 a été utilisé, sans déthyroïdation préalable. La concentration en T3 totale du pool a été mesurée par dosage radioimmunologique.

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Table des matières

Table des matières
Table des illustrations
Liste des abréviations
Introduction
I. Matériel et méthodes 
I.1. Animaux 
I.2. Préparation des solutions à administrer 
I.2.1. Solutions plasmatiques de penta-BDE, de déca-BDE et de plasma contrôle
I.2.2. Solution de T3
I.2.3. Solution de T4
I.3. Plan expérimental 
I.3.1. Profils de concentration des hormones thyroïdiennes, de TSH et de cortisol
I.3.2. Administrations des PBDE et de plasma contrôle
I.3.3. Pharmacocinétique des PBDE
I.3.4. Exposition aux PBDE
I.3.5. Administration de T3 et validation du modèle
I.3.6. Pharmacocinétique de T4
I.3.7. Evaluation de l’effet des PBDE sur la liaison aux protéines plasmatiques
I.3.7.1. Etudes in vitro
I.3.7.2. Etudes in vivo
I.4. Procédures expérimentales 
I.4.1. Thyroïdectomie et pesée des thyroïdes
I.4.2. Pesée des glandes surrénales et des hypophyses
I.4.3. Réalisation des prélèvements sanguins
I.4.4. Traitement des prélèvements sanguins
I.4.5. Méthodes de dosages
I.4.5.1. Dosage de la TSH
I.4.5.2. Dosages de T3, de T4 (libres et totales) et du cortisol
I.4.6. Analyse pharmacocinétique de T4 (libre et totale)
I.4.7. Dialyse à l’équilibre
I.5. Analyses statistiques 
II. Résultats 
II.1. Effet des PBDE sur la TSH 
II.2. Effet des PBDE sur la fonction thyroïdienne 
II.2.1. Effet des PBDE sur les concentrations plasmatiques de T4 et de T3 (libres et totales)
II.2.2. Effet des PBDE sur le poids des thyroïdes
II.3. Effet des PBDE sur la fonction surrénalienne 
II.4. Effet des PBDE sur la pharmacocinétique de T4 libre et totale 
II.5. Effet des PBDE sur la liaison de T3 aux protéines plasmatiques 
II.5.1. Etudes in vitro
II.5.2. Etudes in vivo
III. Discussion 
Conclusion et perspectives 
Références bibliographiques

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