Soutenance mémoire
Description botanique
mexicana est une herbe annuelle ramifiee et dressee, qui atteint 1m de hauteur (Figure N°1). La base est ligneuse, les feuilles sont alternes, sessiles et glabres lanceolees avec le bord lobe et dentele, ces dents sont terminees par des pointes epineuses, les nervures sont alternes, etalees d’un blanc laiteux sur le limbe. On rencontre des epines a la partie inferieure du limbe. Les fleurs sont terminales, ils peuvent atteindre 2,5 a 5cm de diametre avec des sepales verts et des petales jaune vif. Les fruits sont des capsules rectangulaires et ovoides avec de nombreuses epines dressees ou etalees. Le latex est jaune, la graine est brun-noiratre, ronde et nette. Ces graines ressemblent aux graines de moutarde (Brassica compestris) qui fournissent l’huile de moutarde avec lesquelles des falsifications sont possibles. Argemone mexicana est originaire de la partie meridionale de l’Amerique du nord. Elle vit en petit peuplement en general pres des villages et campement, c’est une espece anthropogene. Au Mali elle est retrouvee dans differentes regions (Sangare, 2003).
Toxicite de Argemone mexicana : (Kerharo et Adam, 1974). Beaucoup d’etude sur A. mexicana ont surtout porte sur la toxicite de cette plante qui est signale a diverses reprises comme etant toxique pour l’homme et les animaux. Elle peut entrainer la mort par hemorragies intestinales qui serait due principalement a la consommation du latex et des graines. En effet, l’huile de moutarde qui est utilise pour la cuisson des aliments se trouvait tres souvent contaminee par l’huile de la graine de A. mexicana ou la graine qui contamine les cereales comme le ble. Beaucoup de cas d’intoxication ont ete signales a travers le monde. La premiere a ete signalee a Calcutta en Inde en 1877, puis s’en est suivi d’autres cas au cap en Afrique du sud entre 1946 et 1947 qui ont fait 4 victimes sur 12 intoxiques et chez les poules en Australie. Deux epidemies touchant Delhi et alentours avec 65 morts pour la seule ville de Delhi en 1998, a Saptari au Nepal en 1996. Le mecanisme de la toxicite de l’huile de A. mexicana n’est pas encore clair mais differentes hypotheses ont ete emises, il est plus ou moins lie a La sanguinarine : Inhibition de Na+ et K+ ATP ase. Degradation de la membrane cellulaire par des reactions d’oxydation et la peroxydation des lipides. Inhibition de l’activite de l’ADN polymerase. Accumulation de pyruvate due a une glycogenolyse accrue. L’empoisonnement qui debute brutalement sans signes avant coureurs se traduit rarement par les symptomes diarrhees, vomissements, mais plus souvent par de la constipation et par des troubles de la vision. Les premiers symptomes de l’empoisonnement sont caracterises par des douleurs et des oedemes, mais la veritable epidemie commence avec l’apparition de sarcoides, legeres diarrhees et legers oedemes des jambes. Il a ete montre chez le rat que la DL50 du chlorure de sanguinarine est de 1,66g/Kg (per os) ; ce meme animal ne semble pas souffrir d’une dose quotidienne de 0,6 mg/Kg de sanguinarine pendant 30 jours. La toxicite est beaucoup plus marquee par voie veineuse (IV) (29 mg/Kg) (Kerharo et Adam, 1974).
Solution a analyser : Introduire 10g de la poudre de plante dans un erlemmeyer de 250 ml. Ajouter a cela 50 ml de l’acide sulfurique (H2SO4) dilue au 10%, dans le rapport 1 volume de poudre pour 5 volumes d’acide puis boucher. Agiter et laisser macerer pendant 24 heures a la temperature du laboratoire sous agitation avec un agitateur magnetique. Filtrer sur papier et laver a l’eau de maniere a obtenir environ 50ml de filtrat. B-Caracterisation : Introduire 1 ml de filtrat dans deux tubes a essais, au filtrat du tube N0 1 ajouter 5 goutes du reactif de Dragendorff (solution aqueuse d’iodobismuthite de potassium) et 5 goutes du reactif de Mayer dans le second tube, l’apparition d’un precipite montre la presence d’alcaloides, qui est confirmee par une extraction. Extraction : Methode d’extraction par un solvant en milieu alcalin Humecter 10g de poudre de plante par une solution de NH4OH a 50% (pendant 30mn a 1heure) qui deplace de leurs combinaisons salines ; les bases ainsi liberees sont ensuite solubilisees dans 50ml de chloroforme en deux tranches de 25ml. Le chloroforme contenant les alcaloides est separe du marc par filtration et agite avec 2 fois 25ml de l’acide chloridrique a 5%. Les alcaloides se solubilisent dans la phase aqueuse acide sous forme de sels tandis que les impuretes restent dans la phase chloroformique. La solution aqueuse est alcalinisee jusqu’a odeur avec l’ammoniaque (NH4OH) a 50% puis extraite de nouveau par du chloroforme. Cette solution chloroformique est concentree au Rotavapor a sec dans un ballon preablement tare. La masse obtenue est designee par M (masse d’alcaloides totaux extraits) Le pourcentage en alcaloide totaux (%AT) est calcule par la formule suivante : % AT = 100 x M / PE
Commentaires et discussion
Ce travail au DMT avait pour objectif la formulation d’un sirop antipaludique a base du decocte et de l’extrait hydroethanolique a 70% des parties aeriennes depourvues de graine de Argemone mexicana. Le but est d’elaborer un sirop de bonne qualite, en vu d’ameliorer les formes d’utilisation du phytomedicament et de contribuer dans la prise en charge du paludisme simple. De l’etude macroscopique, il ressort les memes elements macroscopiques que dans les litteratures (Kerharo et Adam, 1974). L’etude microscopique de la plante a ete faite par Guirou en 2008. Il a trouve des groupes de fibres avec des cristaux d’oxalate de calcium, des vaisseaux spirales, des cellules laticiferes et des fragments d’epidermes avec stomates (Guirou, 2008). Pour les essais physicochimiques, la teneur en eau a ete inferieure a 7% dans les deux methodes utilisees. Ce qui montre le bon etat de conservation de l’echantillon utilise. Les constituants chimiques, caracterises par les reactions colorees et par la CCM sont : les alcaloides, les flavonoides, les heterosides cardiotoniques, les oses et holosides, les saponosides, et les tanins. Avec le decocte du tradipraticien en plus de ces groupes chimiques, Sidibe en 2006 avait caracterise les coumarines et les mucilages. Guirou en 2008 sur le decocte de 30 minutes avait caracterise les coumarines et n’avait pas trouve les alcaloides et les heterosides cardiotoniques. Ces differences peuvent etre liees aux zones de recolte des echantillons. Guirou et Sidibe ont fait leurs caracterisations sur les decoctes, alors que dans notre cas, c’est la methode classique d’extraction des alcaloides qui a ete utilisee.
La CCM a permit de confirmer la presence des groupes chimiques caracterises dans la poudre de plante par les reactions colorees de caracterisation et de mettre en evidence la presence des triterpenes dans le decocte lyophilise ; l’extrait ethanolique a 70%, le sirop de l’extrait ethanolique a 10% et l’extrait alcaloidique. Ces triterpenes sont colores en bleu-violet avec le revelateur de l’anisaldehyde (Wagner H. Sabine Bladt ; 1996). Le revelateur universel de Godin a permit de deceler la presence des tanins, des flavonoides, qui se colorent en jaune et violet. Avec le reactif de Dragendorff des taches de couleur rouge ont ete deceles. La coloration rouge avec le reactif de Dragendorff est la caracteristique des alcaloides dans la plante. Il ressort des resultats d’extraction obtenus un rendement meilleur pour l’eau ; 20% et un rendement de 10% pour l’ethanol a 70%. En resume, l’eau extrait plus d’elements que l’ethanol a 70%. Avec ces rendements, nous avons elabores un sirop medicamenteux titre a 20% pour le decocte et un autre titre a 10% pour l’extrait ethanolique a 70%. Les sirops prepares ont une densite egale a la normale (1,26). Le pH compris entre 5 et 6. Ce pH permet de constater une legere acidite des sirops. Il n’y a pas eu de formation de moisissure, ni de depot au controle de qualite des sirops. Les sirops sont restes limpide et stable au controle de qualite pendant une periode de 30 semaines. Des variations de densite son survenues au cours du controle. Elle a augmente pour le sirop du decocte a partir du 15ieme de sa preparation, courant fevrier 2010 de 0,007 et pour le sirop de l’extrait hydroethanolique des la 2ieme semaine de mise au point, dans la semaine du 08/fevrier 2010 de 0,013.
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Table des matières
Objectifs
1-Objectif general
2-Objectifs specifiques
1-Generalites sur le paludisme
1-1-Definition
1-2-Repartition Geographique
1-3-Agent Pathogene
1-4-Transmission
Tableau N01 : Transmission du paludisme en zone endemique
1-5- Le cycle Parasitaire en 2 phases 🙁 www.Medinfos.fr)
1-7-Diagnostique biologique
Tableau N03 : Posologie de l’Artemether injectable
1-11-Medicament traditionnel ameliore (MTA) contre le paludisme
1-12-Rappel sur quelques plantes medicinales utilisees contre le paludisme au Mali
1-Methodologie
1-1-Lieu d’etude
1-2-Materiel Vegetal
1-3-Controle de qualite de la matiere premiere
Tableau N°8 : Pourcentage des constituants dans la poudre de plante
1-3-Constituants chimiques
Tableau N°9 : Les groupes chimiques caracterises dans la poudre de plante
Tableau N014 : Controle de qualite du Lot N001-09-a du 03/07/2009
2-Recommandations
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