Les métabolites primaires des graines de corossol

Les métabolites primaires des graines de corossol

Les métabolites secondaires des graines de corossol

A la suite de la découverte de l‟uvaricine (Jolad et al., 1982), les recherches sur les graines de corossol ont été principalement axés sur l‟isolement d‟acétogénines. Ces dernières constituent les métabolites majoritaires. En 1990, les premières recherches ont permis d‟isoler la murisoline (Myint et al.). En 1991, quatre acétogénines ont été rapportées : la solamine (Myint et al.), la corossolone ainsi que la corossoline (Cortes et al., 1991b) et la muricatacine (Rieser et al., 1991). Les épomuricénines A et B, des acétogénines dotées d‟un noyau époxyde, ont été isolées deux ans plus tard (Roblot et al., 1993). En 1996, Rieser et al. ont réussi à isoler cinq acétogénines en C35 dont deux appartiennent à la série des annonacines et trois sont des isomères de la goniothalamicine. Des acétogénines linéaires, le murihexol (Yu et al., 1998) et les cohibines C et D (Gleye et al., 2000b), ont également été rapportées. Les deux dernières, contenant deux diols vicinaux, seraient impliquées dans la biogénèse des acétogénines à noyau tétrahydrofurane flanqué de deux hydroxyles. Les travaux de Liaw et al. (2002) ont aussi permis de connaître l‟existence d‟autres acétogénines possédant des diols vicinaux, les muricines H et I, ainsi qu‟une autre acétogénines à noyau THF, l‟annomontacine. Les graines de corossol contiennent également une acétogénine à deux THF adjacents, la robustocine (Gleye et al., 2000a). Lors de ces recherches d‟acétogénines, les métabolites primaires n‟étaient pas valorisés malgré leur forte proportion.

Structure chimique des acétogénines

Les acétogénines sont isolées principalement de la famille des Annonacées. Comportant 35 à 38 atomes de carbone (Rupprecht et al., 1990), voire 39 comme l‟uvaricine (Jolad et al., 1982), elles résultent biogénétiquement de la combinaison d‟une chaîne alkyle avec une unité propan-2-ol (Liaw et al., 2010 ; McLaughlin, 2008). Leur squelette est constitué d‟un noyau γ-méthyl-lactone α,β-insaturée et d‟une longue chaîne alkyle. Le noyau γ-lactone peut être saturé ou hydroxylé (Cortes et al., 1991c). La chaîne alkyle peut être linéaire et comporter des doubles liaisons, des fonctions alcools ou cétones (Gleye et al., 1997a, 1998c ; Yu et al., 1998). La chaîne peut également porter un noyau époxyde (Roblot et al., 1993), un noyau tétrahydrofurane (Cortes et al., 1991a) ou deux THF adjacents ou non (Chang et al., 2003 ; Gleye et al., 2000a). En général, ces acétogénines se présentent avec des hydroxyles libres et rarement sous forme d‟esters d‟acides gras comme dans le cas du palmitate ou l‟oléate de solamine (Gleye et al., 1998b). Quelques exemples de structures sont illustrés sur la figure 3.

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1 Synthèse bibliographique
1.1 La classification botanique de la plante et description du fruit
1.2 Les métabolites primaires des graines de corossol
1.3 Les métabolites secondaires des graines de corossol
1.4 Les acétogénines
1.4.1 Structure chimique des acétogénines
1.4.2 Activités biologiques des acétogénines
1.5 L’hydrogénation catalytique d’une acétogénine
1.6 Les tests biologiques
1.6.1 Évaluation de l’activité larvicide
1.6.2 Toxicologie et évaluation de la toxicité
1.6.3 Évaluation de la toxicité sur les nauplii d’Artemia salina
1.7 Les solvants d’extraction des composés des Annonacées
1.8 Les lipides
1.8.1 Applications des huiles
1.8.2 Méthodes d’analyses des huiles
2 Matériels et méthodes
2.1 Matériels végétaux
2.1.1 Détermination de la proportion de chaque partie du fruit
2.1.2 Détermination de la teneur en eau des graines
2.1.3 Détermination de la proportion en téguments et en amandes des graines
2.1.4 Détermination de la teneur en eau des amandes des graines
2.1.5 Traitements des graines avant extraction
2.2 Solvants
2.3 Extraction des produits dans les graines
2.3.1 Macération à froid
2.3.2 Chauffage à reflux
2.3.3 Traitement au Soxhlet
2.4 Fractionnement des extraits éthanoliques
2.5 Isolement des produits
2.6 Mesure du point de fusion de l’acétogénine
2.7 Hydrogénation catalytique d’acétogénine
2.8 Caractérisation de l’huile de graines de corossol
2.8.1 Détermination de la teneur en huile de la matière végétale
2.8.2 Caractérisation physique et chimique de l’huile
2.8.3 Préparation des esters méthyliques d’acides gras (EMAG)
2.9 Détermination de la teneur en protéines brutes du résidu d’extraction
2.10 Analyses chromatographiques et détermination structurale
2.10.1 Analyses par chromatographie sur couche mince (CCM)
2.10.2 Analyses par CLHP des sucres
2.10.3 Analyses par CPG des EMAG
2.10.4 Analyses par CPG/SM des EMAG
2.10.5 Analyses par Résonance Magnétique Nucléaire (RMN)
2.10.6 Analyses en Spectrométrie de Masse (SM)
2.11 Tests biologiques
2.11.1 Tests larvicides
2.11.2 Tests de toxicité sur Artemia salina ou test de « Brine shrimp »
2.11.2.1 Première étape : éclosion des cystes d’Artemia salina
2.11.2.2 Deuxième étape : sélection des nauplii
2.11.2.3 Troisième étape : lancement des tests de toxicité
2.11.3 Tests de toxicité du résidu d’extraction
2.12 Analyses statistiques des données
3 Résultats et discussions
3.1 Caractérisation du matériel végétal
3.1.1 Proportion des différentes parties du fruit
3.1.2 Teneur en eau des graines
3.1.3 Proportion en téguments et en amandes des graines
3.1.4 Teneur en eau et en matières volatiles des amandes des graines
3.2 Caractérisation des composés des graines entières de corossol
3.2.1 Teneurs et profil des extraits dans les graines entières
3.2.1.1 Huile des graines entières
3.2.1.2 Extraits éthanoliques des graines entières
3.2.2 Fractionnement des extraits éthanoliques obtenus par macération
3.2.3 Isolement de l’annonacine par fractionnement bioguidé
3.2.4 Résultats des tests larvicides au cours du fractionnement bioguidé
3.2.4.1 Evaluation de la DL50 de l’extrait dichlorométhanique (GR51)
3.2.4.2 Activité larvicide des fractions issues de l’extrait dichlorométhanique
3.2.5 Études du dérivé de l’annonacine : la dihydro-annonacine
3.2.5.1 Obtention de la dihydro-annonacine
3.2.5.2 Activité larvicide de l’annonacine
3.2.5.3 Activité larvicide de la dihydro-annonacine
3.2.5.4 Toxicité de l’annonacine et celle de ses dérivés hydrogénés
3.3 Caractérisation des composés des téguments de graines de corossol
3.3.1 Huile des téguments
3.3.1.1 Teneur en huile des téguments
3.3.1.2 Profil CCM de l’huile des téguments
3.3.1.3 Analyse RMN 1H et 13C de l’huile des téguments
3.3.2 Extraits éthanoliques des téguments
3.3.2.1 Obtention des extraits éthanoliques des téguments
3.3.2.2 Analyse CCM des extraits éthanoliques des téguments
3.3.2.3 Analyse en SM de l’extrait éthanolique des téguments
3.3.2.4 Analyse en RMN 1H de l’extrait éthanolique des téguments
3.4 Caractérisation des composés des amandes de graines de corossol
3.4.1 Teneur, profil et activités biologiques des extraits bruts des amandes
3.4.1.1 Huile et produits polaires des amandes
3.4.1.2 Extraction directe par l’éthanol
3.4.2 Comparaison des extraits éthanoliques des amandes des graines
3.4.2.1 Aspect physique des extraits éthanoliques
3.4.2.2 Profil CCM des extraits éthanoliques obtenus par diverses méthodes
3.4.2.3 Activité larvicide des extraits éthanoliques
3.4.3 Les fractions issues des extraits éthanoliques
3.4.4 Composition en acétogénines de l’extrait CH2Cl2 (GR273MMD)
3.4.4.1 Isolement des acétogénines
3.4.4.2 Analyse CCM des acétogénines
3.4.4.3 Analyse structurale des acétogénines isolées
3.4.4.4 Proportion des acétogénines isolées
3.4.4.5 Données bibliographiques sur les acétogénines isolées
3.4.4.6 Détermination structurale des diastéréoisomères de la dihydro-annonacine
3.4.5 Étude de l’extrait AcOEt
3.4.5.1 Hydrogénation catalytique de l’extrait AcOEt
3.4.5.2 Activités biologiques des extraits AcOEt
3.4.6 Caractérisation des huiles d’amandes de graines de corossol
3.4.6.1 Huile extraite à l’hexane par traitement au Soxhlet
3.4.6.2 Huile obtenue par traitement au Soxhlet avec EtOH 95° suivi de séparation liquide/liquide
3.4.6.3 Profil CCM des huiles d’amandes de graines de corossol
3.4.6.4 Caractères organoleptiques des huiles d’amandes de graines de corossol
3.4.6.5 Caractéristiques physico-chimiques des huiles
3.4.6.6 Acides gras des huiles d’amandes de graines de corossol
3.4.6.7 Analyse RMN de l’huile extraite à l’hexane par Soxhlet
3.4.6.8 Analyse en SM de l’huile d’amandes de graines de corossol extraite à l’hexane par Soxhlet
3.4.6.9 Activités biologiques des huiles d’amandes de graines de corossol
3.4.7 Profil et teneur des produits dans l’extrait aqueux
3.4.7.1 Analyse CCM de l’extrait aqueux
3.4.7.2 Isolement du saccharose
3.4.7.3 Analyses en CLHP
3.4.8 Études du résidu d’extraction
3.4.8.1 Composés dans le résidu
3.4.8.2 Toxicité du résidu d’extraction
Conclusion générale et perspectives
Références documentaires